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血球计数板计数误差来自哪些方面?

来源:http://www.ycfzbl.com/news/439.html   发布时间:2022-07-18

血球计数板计数误差来自哪些方面?


错误等因素造成的误差是技术误差,而仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确精密造成的误差称为仪器误差,细胞分布不均等
机器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可以通过规范操作、提高熟练程度、校准仪器来避免或纠正,但难以完全消除细胞分布误差。因此,要搞好红细胞计数质量控制,一般需要采取以下措施。
1.避免技术误差,纠正仪器误差
(1)所用器材应清洁干燥,血球计数板、血盖片、微吸管及刻度吸管规格必须符合要求或经校准。
血球计数板鉴定:要求计数室地面光滑、透明、划线清晰,计数室划线面积准确。根据需要使用严格校准的目镜测微仪测量计数室的边长和底面积,使用测微仪测量计数室的深度。美国中国标准局(NBS)规定,每个方格边长的误差必须小于1%±0.1mm,深度误差必须小于2%,即0.10±0.02毫米。超过上述标准的,应当舍弃。血罩片应有一定重量,平整、光滑、无裂纹、厚薄均匀,可用游标卡尺多点测量。不均匀度为0.002毫米以内。根据需要使用平面平行器进行测量和评估,要求呈现密集平行的直线干涉条纹。简单的评估方法是将干净的覆盖物紧贴干燥的平面玻璃,如果一定时间没有吸附脱落,坠落时会呈弧形旋转,表明覆盖物平整、厚度均匀。另外,将合格的盖片放置在计数室的表面后,在紧贴支撑柱的部位可以看到彩虹。筛选出的覆盖物与其他覆盖物紧密重叠后,在掠射光线下观察,若发现完全平行的彩虹条纹,说明另一个覆盖物的质量也符合要求。目前临床实验室多采用一次性微量采血管采集毛细血管血。除定点采购可靠厂家产品外,还支持逐批采血管抽样检测,可采用汞称量法或有色溶液比色法校正,误差不得超过1%。
(2)红细胞稀释液应为等渗、新鲜、无杂质的微粒。
(3)严密操作,从消毒、采血、稀释、充池到计数都要规范。尤其需要注意的是在血样稀释和池填充时充分搅拌,防止剧烈震荡破坏红细胞。一次应充满计数室,防止产生气泡,填充细胞悬液的量宜不超过计数室地面与血盖片之间的矩形边缘。报告法定计量单位。
2.缩小计数域误差或分布误差。由于血细胞填充计数室后呈随机分布,或称为Poisson分布,但我们能计数的细胞分布范围有限,导致的计数误差称为计数域误差或分布误差。减小这种误差的有效方法是尽量扩大细胞的计数范围和计数。一般来说,如果能把误差控制在允许范围内,先进行误差的推定,确定必要的计数和计数范围。Berkson指出,如果使用同一根吸管、同一面的计数室,计数就会变为0.2mm2面积的细胞数有望控制在CV可接受的7%以内。关于红细胞的计数,由于红细胞数量多,在计数室显得比较“拥挤”。根据Poisson式推定。要将误差控制在变异百分率5%以内,至少需要在计数室计数400个红细胞,因此需要计数5个中格子红细胞。实际上Berkson还通过实验证明了红细胞的计数域误差为s=0.92小于理论误差(Poisson分布误差)。
3.排除异常标本干预白细胞数在正常范围时,对红细胞数的影响可忽略,但白细胞过高时(p为
100109/L)的话,需要修正计数结果。方法包括:计算实际RBC=RBC-WBC。红细胞换算后为3.51012/L,白细胞换算为100109/L时,患者实际红细胞数应为3.41012/L。高倍镜下计数时,避免有核细胞。有核细胞比正常红细胞体积大,中央无凹陷,无草黄色折射光,隐约可见细胞核。此外,患者急性重症贫血时,网织红细胞可早期大量释放,对红细胞计数造成一定的干扰,甚至影响网织红细胞的值计算结果。其修正方法有待研究。
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