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怎样正确使用血球计数板?

来源:http://www.ycfzbl.com/news/433.html   发布时间:2022-06-20

怎样正确使用血球计数板


血球计数板使用方法如下。
1、根据待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每格菌数为限。
2、取干净血细胞计数板一块,计数区覆盖玻璃罩。
3、摇匀菌悬液,用滴管吸一点,从计数板中间台两侧凹槽沿玻璃罩下缘滴一点。(不宜过多)菌悬液充满液体表面张力计数区,避免产生气泡,吸水纸吸取沟槽流出的多余菌悬液。将菌悬液直接滴加到计数区,然后为了不产生泡沫,也可以不使菌悬液附着在计数区两侧的载物台上,覆盖玻璃罩后,使计数区的深度上升。
4、静置一段时间,使细胞沉降在血球计数板上,不与液体一起漂移。将血细胞计数板放在显微镜平台上稳定,一旦在低倍镜下找到计数区,切换高倍镜进行观察和计数。生活细胞的折射率和水的折射率很接近,所以观察时请减弱光的强度。
5、计数区由16个中格子组成,按对角线方位计数左上、左下、右上、右下4个中格子,即100格菌数。如果是由25个中格子组成的计数区,除上述4个中方外,必须计数中央1个中格子。
菌数(即80个格)。为保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,计数时应统一规定格线沉降的细胞统计。菌体在大方格双线时,为减少误差,计数时不计数上线不计数下划线,计数左线不计数右线。即,本格上线和左线上的细胞按本格计数,本格下划线和右线上的细胞按规定按相应格计数。
6、对于出芽酵母菌,芽体达到母细胞大小的一半时,可计算为两个菌体。每个样品重复计数2-3次,每次数值不能差异很大。否则,应该重新操作。(用公式计算每1mL(g)菌悬浊液中含有的细胞数。
7、测量结束后,取下玻璃罩,用水冲洗干净血细胞计数板,不要用硬的东西清洗或擦拭。请不要损伤网格刻度。清洗后自己晾干或用吹风机晾干,放入盒中保存。
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